交通事故第二次鉴定多久失效没有规定，但有鉴定时效。根据民诉法司法解释，法院对交通事故做二次鉴定有期限，必须在法院规定的举证期限之内向法院提出申请。当事人申请鉴定，可以在举证期限届满前提出。
《最高人民法院关于适用中华人民共和国民事诉讼法的解释》第一百二十一条
当事人申请鉴定，可以在举证期限届满前提出。申请鉴定的事项与待证事实无关联，或者对证明待证事实无意义的，人民法院不予准许。
人民法院准许当事人鉴定申请的，应当组织双方当事人协商确定具备相应资格的鉴定人。当事人协商不成的，由人民法院指定。
